【摘要】目的 对HIV抗体初筛阳性血清进行确认，了解河池地区H IV 感染者型别特征，为艾滋病防治工作提供准确科学的依据。 方法 用ELISA、胶体硒对河池市各地检测后上送的HIV抗体初筛阳性标本及本中心门诊、哨点监测等标本949份进行初筛、复核，阳性者用WB试验进行确认。结果 949份血清中，经ELISA、胶体硒初筛复核，268份为HIV 抗体阳性，其中260份确认为HIV-1抗体阳性；条带出现百分率：gpl60为100%、gp120和gp41为99.62% ，p66 、p51、 p31、 p24、 p55 、p17、p39分别为98.08%、93.83% 、95.00%、96.46% 、53.85%、69.23%、61.54%。结论 河池地区的感染者多为HIV-1 型感染者，初筛结果有假阳性须经确认试验才能得出准确结果。
【关键词】HIV抗体 免疫印迹试验
中图分类号：R446.6 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2011）3-316-02
艾滋病病毒(HIV)抗体免疫印迹试验(WB)是目前国内HIV抗体确认的首选方法，它能同时检测不同HIV抗原组分的抗体，其敏感性和特异性较高，可用于鉴别或肯定初筛试验结果。河池市疾病预防控制中心艾滋病检测确证实验室是2009年1月通过国家级评审验收。艾滋病检测确证工作的开展，大大方便了感染者和病人。为了解河池地区H IV 感染者型别特征现将2011年河池市艾滋病确认实验室对各地检测后上送的HIV抗体初筛试验阳性标本及本中心门诊、哨点监测等标本的初筛与WB确认试验结果分析如下：
1 材料与方法
1.1 标本来源 268份初筛HIV抗体阳性血清来源于2011年1月～10月的949份标本中筛出，主要为河池市所辖县（市）区疾病预防控制中心、血站、医院等部门送检的初筛试验检测为HIV抗体阳性的血清及本中心确认实验室初筛阳性的标本等。
1.2 检测方法 标本先采用酶联免疫吸附试验(ELISA)或 胶体硒快速检测。凡第一次初筛试验阳性的标本，再用同种试剂(双孔)和另一种试剂复检，阳性血清用WB试验进行确认。ELISA 试验使用生物梅里埃、北京金豪、北京吉比爱、珠海丽珠试剂; 快速试验使用雅培硒标 试剂。均在有效期内使用, 按试剂盒说明书操作。 EL1SA 法使用Wellwashplus型自动酶标洗板机和郑州2010酶标仪。确认试验 WB试剂来自新加坡Genelabs公司生产的Diagnostics HIV Blot，均在有效期内使用。试验按说明书操作，由2名实验室人员分别记录结果综合判定。
1.4 WB试验结果判断标准 按中国疾病预防控制中心《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）[1]的标准判断，同时符合以下2条标准可判为HIV-1抗体阳性：①至少有2条env带（gp41和gp160/gp120）出现，或至少1条env带和p24带同时出现；②符合试剂盒提供的阳性判定标准。判定HIV-1抗体阴性：无HIV抗体特异带出现；HIV抗体不确定：出现HIV抗体特异带，但不足以判定阳性。
2 结果
2.1 初筛试验结果 949份标本经用ELISA(661份)和胶体硒(288份)法筛查，268份（ELISA阳性83份，胶体硒阳性185份）为HIV抗体阳性。
2.2 WB确认试验结果 268份初筛阳性的标本经确认试验，结果260份被确认为HIV-1抗体阳性，占97.01%；5份被确认为HIV-1抗体不确定，占1.86% ；3份被确认为HIV-1抗体阴性，占1.12% 。其中，ELISA试剂盒检测阳性的83份中，假阳性1份，假阳性率为1.20%，胶体硒试剂盒检测阳性的185份中，假阳性2份，假阳性率为1.08%。
2.3 带型结果 确认的260份阳性标本中，呈现全带型152份，占58.46%； 8条带的52份，占20.00% ；7条带的39份，占15.00%， 6条带的12份，占4.62%；5条带的3份，占1.15%,4条带的2份，占0.77%。260份中，env(HIV被膜蛋白)带型中的gpl60均阳性，259份gpl20和gp41阳性；pol(HIV多种酶蛋白)带型中，p66 255份阳性、p51 244份阳性、p31 247份阳性；gag(HIV型相关核心蛋白)带型中，p55 140份阳性，p24 256份阳性，p17 180份阳性, p39 160份阳性，详细见表1。WB试验报告为HIV抗体不确定的5例为可疑结果，只呈现出gpl60、gpl20、gp41、p24带型，其中2例有gpl60带，1例有p24带，1例有gp41带，1例有gpl60gpl20带。产生不确定结果原因有待今后追综检测分析探讨。
表1 260份血清确认试验带型分布
3 讨论
本组268份血清初筛为HIV-1抗体阳性者，经WB确认后有260例(占97.01% )为HIV-1抗体阳性，符合率较高，但仍出现3例假阳性，原因可能是由于筛查诊断试剂的敏感性高而特异性不如确认试剂，故不可避免的会出现复检试验阳性经确认试验为HIV抗体阴性的结果，往往是由于一些非特异性抗原引起的免疫交叉反应引起的。HIV病毒的抗原与其他逆转录病毒（HTLV） 有交叉反应, HIV感染的淋巴细胞抗原与一些人血清中的HLA抗体有交叉反应等[2]，因此，初筛试验时应选用高敏感性、高特异性的试剂，尽可能避免假阳性的发生，初筛试验阳性血清必须通过确认试验才能下结论。
检测结果显示，有5份结果为HIV-1抗体不确定。这是WB的缺点之一，可在某些情况下产生大量的不确定结果，不仅初筛阳性的标本可以出现不确定的结果，初筛阴性的标本做WB检测时也有大约15%出现针对一个或几个抗原的不确定结果。不确定结果可能提示HIV早期感染或者是一种非特异反应，究竟是哪一种情况取决于危险因素、临床表现以及WB的带型。持续的不确定结果可能提示非特异反应，有时AIDS病人也可以表现为持续的不确定结果。而对于WB检测的不确定结果，不论是哪一种可能都应进行随访，随访时间为1-6个月不等。如果6个月以后，带型消失或没有进展，可以排出HIV感染的可能，报告HIV抗体阴性；如果在随访过程中出现了带型的进展，特别是出现了包膜抗原的条带，可以确定是HIV早期感染。病毒分离培养、核酸检测和抗原检测，也有助于对不确定结果的解释[3]。
确认试验表明, 目前河池地区的感染者仍多为HIV-1型感染者, 与国内HIV 流行情况一致。在260份确认为HIV-1抗体阳性的血清中，152(58.46%)份出现env、pol、gag全带型，表明这些感染者体内病毒繁殖活跃，具有较强的传染性。检测结果显示外膜糖蛋白gp160出现机率为100% 、gp120及 gp41出现机率为99.62%，说明这些抗原成份是确认HIV感染的必要条件，p66 、p51、 p31及 p24出现机率分别为98.08%、93.83% 、95.00%及96.46%，说明这些抗原成份是HIV感染中常见的成份。检测结果显示，区带p39出现机率达61.54%，明显高于有关文献报导（10．20％）[4]，而P55、P17明显又低于文献[5]报导(94%以上)，提示不同地区带型出现机率有所不同，其中原因有待探讨。
近年来河池地区HIV检出率快速增长，实验室为适应艾滋病防治要求，应加强自身能力的建设，促进实验室规范化管理，提高实验室检测质量和检测水平，消除影响结果的各种因素，确保检测结果的准确性和可靠性。又由于实验室提供的检测数据是艾滋病防治措施制定的重要依据之一，检测数据资料不仅要准确，而且要全面，一没有流行病学背景的阳性结果，它的意义是有限的，因此，实验室要提高自身整体能力，按要求规范化操作，保证检测结果准确全面无误，为艾滋病防治工作提供准确科学的依据。
参考文献
[1]卫生部.全国艾滋病检测技术规范（2009年修订版）[Z].
[2]欧泽惠,张秀兰,王军，等.献血者抗-HIV检测结果误差的原因分析［J］.现代医药卫生,2007,23（6）：893.
[3]广西壮族自治区疾病预防控制中心.广西艾艾滋病综合防治技术指导手册（2010年）[Z].
[4] 杨新原，王洪，王庆春，等. 大理地区HIV-1抗体阳性者蛋白印迹带型分析[J]. 《现代医药卫生》 2009,25(7)：1020-1021．
[5] 姜楠，H IV抗体初筛阳性标本确认实验结果及带型分析[J]. 河南预防医学杂志2005，15（5）：276-277.