摘要：目的：观察冠心平对血管内皮分泌因子NO、NOS、ET、AngII水平的影响，探讨冠心平治疗冠心病的相关机制。方法：采用金黄地鼠喂饲以高脂饲料，建立动脉粥样硬化模型，模型建立后，随机分成正常对照组、模型对照组、阳性药对照组、冠心平大、小剂量组，各组给予相应药物，8周后，检测金黄地鼠外周血清中NO、NOS、AngII含量和血浆中ET的水平。结果：冠心平具有升高高脂饲料致金黄地鼠冠状动脉粥样硬化后血清NO水平和降低血浆ET含量的作用，同时也可以降低血清AngII水平和调节NOS水平。结论：冠心平通过对血管内皮因子NO、NOS、ET、AngII水平的调节，达到改善动脉粥样硬化症状，保护冠心病患者心脏和血管的作用。
关键词：冠心平；血管内皮功能；动脉粥样硬化
中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717(2012)03-0532-03
The Effects of Guanxinping on NO,NOS,ET,AngII in
Mesocricitus Auratus with Atherosclerosis
WAN Meng,LI Qi?yi,ZHU Xuan?xuan,YAN Shi?hai,SHI Lin?feng
(Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210029, Jiangsu, China)
Abstract:Objective:The essay is meant to observe the effects of Guanxinping on the levels of NO,NOS,ET and AngII secreted by vascular endothelial and discuss possible mechanism of Guanxinping in treating coronary heart disease.Methods:Feed mesocricitus auratus with high fat diet in order to establish a model of AS. After the model was built, we divided models into normal control group, model group, positive control group, low dose group, and high dose group. Administration in each group with each drug lasted for 8 weeks. Then detect NO,NOS,ET,AngII in serum and plasma of mesocricitus auratus. Results:Guanxinping decreased ET,AngII and NOS and increased the level of NO secreted by vascular endothelial. Conclusion:Guanxinping could have effects of adjusting the levels of NO,NOS,ET and AngII in order to protect heart and vessels of AS patients.
Key words:Guanxinping;vascular endothelium;atherosclerosis
收稿日期：2011-10-05
基金项目：教育部博士点基金资助项目（20093237110001）；江苏省康缘中医药科技创新与奖励基金资助项目（HZ0803KY）
作者简介：万盟（1985-），男，江苏南京人，2009级硕士研究生，研究方向：药理学。
通讯作者：李七一（1951-），男，主任医师、教授，博士研究生导师，研究方向：心血管疾病。
朱萱萱（1952-），女，江苏南京人，主任药师、教授，博士研究生导师，研究方向：中药药理学。冠心病（CHD）是成年人死亡的重要原因，极大的威胁人类健康，并给社会及家庭带来了沉重的经济负担[1]。冠心平由黄精、当归、三七、瓜蒌皮和甘松5味药组成，源自古方化裁和经验积累。方中黄精补中益气，润心肺，补肝明目，补益精气，久服轻身延年不饥，是为君药。当归养血活血，补中有行，补而不滞，三七活血化瘀通脉，共为臣药。经多年临床研究证实本药对冠心病有良好的疗效，并对血管内皮有保护作用[1-2]。研究表明内皮损伤是动脉粥样硬化的始动因素，内皮功能障碍在冠心病发病过程中起着重要作用[3]。内皮分泌的心血管活性物质,如NO、ET、AngⅡ等对心血管系统功能具有重要调节作用，并参与多种心血管疾病的病理生理过程。近年来研究表明ET和NO的失衡与心血管舒缩功能障碍和AS的形成有着密切的关系[4]。本实验通过建立金黄地鼠冠状动脉粥样硬化（AS）模型，旨在研究冠心平对冠心病中血管功能障碍的影响，为探讨中医药防治心血管系统疾病提供实验依据。
1实验材料
1.1实验用药
冠心平，由江苏省中医院制剂部提供，批号：100330；辛伐他汀，鲁南贝特制药有限公司，批号：100410。
1.2实验仪器
Labofuge 400R低温冷冻离心机，Thermo electron corporation提供；MODELDS-671电子秤，上海寺冈电子有限公司；AR1140电子天平，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司制造；BP-Ⅱ型架盘药物天平，上海医用激光仪器厂；数显恒温水浴锅HH-2，国华电器有限公司；紫外分光光度计，上海光谱仪器有限公司；酶标分析仪：Sunrise-basic TECAN。
1.3实验动物
金黄地鼠，体重（150±10）g，雌雄各半。由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：SCXK(京)2006-0009。
1.4实验试剂
NO试剂盒：由南京建成生物工程研究所提供，批号：20110215；NOS试剂盒：由南京建成生物工程研究所提供，批号：20110215；AngⅡ试剂盒：美国BD公司提供，批号：LOT#G025-10；ET试剂盒：美国BD公司提供，批号：LOT#G025-10。
1.5统计学处理
采用SPSS 15.0软件分析，主要统计指标进行正态性检验，正态分布的各个统计指标以均数±标准差(±s)表示。组间对比分析采用配对t检验；两样本均数比较采用t检验及SNK检验。
2实验方法
2.1动脉粥样硬化模型的制备
动物均分笼适应性喂养(普通饲料饮水不限，自由摄食)，1周后，随机取10只作为正常对照组。其余40只喂以高脂饲料（94%基础饲料、1%胆固醇、5%猪油配制），喂养8周，造成金黄地鼠动脉粥样硬化模型。
2.2分组及给药
将经高脂饲料喂养8周的40只金黄地鼠随机分为4组：①模型组10只，继续喂高脂饲料；②小剂量治疗组10只，喂高脂饲料加冠心平制剂8.38g/(kg?d)；③大剂量治疗组10只，喂高脂饲料加冠心平制剂16.75g/(kg?d)，④阳性药物对照组10只，喂高脂饲料和辛伐他汀5mg/(kg?d)。模型组与正常组给予等量生理盐水，连续8周。所有金黄地鼠在高脂和普通饲料分组后，实验过程中饲养条件不发生改变。
2.3取材
给予治疗药物8周，末次给药2h后，10%水合氯醛3mL/kg腹腔注射，在麻醉状态下去胸腹部被毛，将金黄地鼠仰卧固定在手术架上，从腹正中线皮肤切开腹腔，使腹主动脉清楚暴露，用无菌注射器吸出血液，约4mL，防止溶血。分为两份，一份2mL在2h内完成离心，取上层血清于-20℃保存备用。另一份2mL注入含10% EDTA二钠30μL和抑肽酶40μL的试管中，混匀。4℃，3000r/min离心10min，分离血浆，于-20℃保存。测定前使样本置于室温中复融，再次4℃，3000r/min离心5min，取上清液测定。
2.4NO、NOS、AngⅡ检测
取血清按NO、NOS、AngⅡ各自试剂盒操作说明进行检测。
2.5ET检测
取血浆上清液，按ET试剂盒操作说明进行检测。
3实验结果
3.1冠心平对AS金黄地鼠血清NO、血浆ET含量的影响
高脂饲料喂养金黄地鼠建立冠状动脉粥样硬化后，模型组金黄地鼠与正常组相比，血清NO含量明显下降、血浆ET含量明显上升，具有显著性差异（P [4]李海英,杨晓庆,李海敏.芪脂饮对动脉粥样硬化家兔内皮素及一氧化氮合酶含量的影响［J］.中华中医药学刊,2007,25(8):1652-1654.
[5]John E. Deanfield, Julian P. Halcox, Ton J. Rabelink. Endothelial Function and Dysfunction［J］. Circulation,2007,115: 1285-1295.
[6]Iglarz, Marc PhD; Clozel, Martine MD. Mechanisms of ET-1-induced Endothelial Dysfunction［J］. Journal of Cardiovascular Pharmacology,2007,50(6):621-628.
[7]Saitoh, Shu-Ichi,Matsumoto et al. Novel pathway of endothelin-1 and reactive oxygen species in coronary vasospasm with endothelial dysfunction［J］. Coronary Artery Disease, 2009, 20(6):400-408.
[8]Joaqu n de Haro Miralles, Aurora Fl rez G nzalez, C sar Varela Casariego, et al. Onset of peripheral arterial disease: role of endothelin in endothelial dysfunction［J］.Interactive Cardio Valcular and Thoracic Surgery,2010,10:760-765.
[9]Claudio Napoli and Louis J. Ignarro. Nitric oxide and pathogenic mechanisms involved in the development of vascular diseases［J］. Archives of Pharmacal Research,2009,32(8):1103-1108.
[10]Ulf Landmesser,Stephan Spiekermann,Christoph Preuss. Angiotensin II Induces Endothelial Xanthine Oxidase Activation. Role for Endothelial Dysfunction in Patients With Coronary Disease［J］. Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology,2007,27:703-704.
[11]严士海,李七一,朱萱萱,等.冠心平对H2O2致血管内皮细胞损伤的影响［J］.中国民族民间医药,2010,19:18-19.[FK(B80012*2。14〗