【摘要】目的 通过测定外周血T淋巴细胞核仁相关蛋白(Ag-NORs) 的水平，研究脑卒中患者细胞免疫功能变化。方法 选择72小时内首次发病的脑卒中患者，于发病72小时内、第14-15天抽血，健康对照组抽血检测1次，对外周血T淋巴细胞进行染色分析，以核仁银染面积与细胞核面积比值（I.S%）作为Ag-NORs检测指标。应用SPSS13.0软件进行统计分析，计量资料两组间比较采用t检验；多组间比较采用方差分析F检验和q检验。结果 1、脑卒中患者急性期外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平（I.S%）明显降低（P＜0.01），发病后第14-15d Ag-NORs水平较72h内高（P＜0.01），但仍低于健康对照组（P＜0.01）。2、脑梗死发病后同一时期重度患者外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平较轻度患者低（P＜0.05）。结论 脑卒中急性期细胞免疫功能低下，脑梗死发病后细胞免疫功能可能与病情程度有关。
【关键词】脑卒中 细胞免疫 Ag-NORs
中图分类号：R743.3 文献标识码：A 文章编号：1005-0515（2012）3-051-02
Changes of Ag-NORs in peripheral blood T lymphocytes
in patients with acute cerebral stroke
【Abstract】Objective To study the changes of Ag-NORs in peripheral blood T lymphocytes in patients with acute cerebral stroke. we hope to understand the cellular immunity after stroke onsets.Methods Patients with first-ever acute stroke within the first 72 hours after stroke onset were included. Thirty control subjects, matched for age and sex were enrolled. Subjects with inflammatory or infectious diseases, cancer, immunologic disease, or severe renal or liver failure were not included in the study. Patients who took chemotherapy, radiotherapy, operation, biological agent or immuno- suppressive drugs (within 1 month before admission) and complicated secondary infection were also excluded. The ratios of nucleolar areas by silver staining to nuclear areas (I.S%) were the index of Ag-NORs. SPSS 13.0 software was adopted to carry out the data processing and analyses. T test was adopted to carry out the comparison of the two groups. Results 1). As compared with the controls, the levels of Ag-NORs of T lymphocytes in patients with acute cerebral stroke were decreased (P 1.2.3 检测方法 对外周血T淋巴细胞进行染色分析，以核仁银染面积与细胞核面积比值（I.S%）作为Ag-NORs检测指标（正常参考值为6％－10％）。检测独立于临床和放射学资料。采用改良爱丁堡斯堪的那维亚评分标准（scandinavian stroke scale， SSS），分轻度（1-15分），中度（16―30分），重度（31―45分）。
1.2.4 统计学处理 数据用X±S表示，应用SPSS 13.0统计软件进行统计分析。计量资料两组间比较根据方差齐性与否采用t或t’检验。P＜0.05作为具有统计学显著性差异的标准。
2 结果
2.1 脑卒中各组不同时期外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平较对照组均明显降低（P＜0.01），14-15d较72h内高（P＜0.01），脑梗死组与脑出血组比较，差异无显著性，见表1。
表1 脑卒中组不同时期Ag-NORs水平及对照组的比较（I.S%，X±S）
**与对照组比较，P＜0.01，△与发病后72h比较，P＜0.01
2.2 脑梗死组轻、中度患者，外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平14-15d较72h内高（P＜0.05），重度患者不同时期比较，差异无显著意义；发病后同一时期重度患者Ag-NORs水平较轻度患者低（P＜0.05），见表2。脑出血组发病后同一时期不同病情Ag-NORs水平未见明显差异（P＞0.05）。
表2 不同病情脑梗死组发病后不同时期Ag-NORs的比较（I.S%，X±S）
*与72h比较，P＜0.05，△与同时期轻度患者比较，P＜0.05
3 讨论
免疫系统是机体自身保护的防御性结构，包括体液免疫和细胞免疫。T淋巴细胞在细胞介导的免疫调节方面发挥重要作用。核仁是由核仁形成区（NOR）产生的，是核糖体（rRNA）的组装工厂。B23与C23蛋白是核仁形成区中位于rDNA、rRNA周围的能够被硝酸银染色的酸性非组蛋白[1]，简称核仁相关蛋白（Ag-NORs）。它们参与并调控rRNA的转录和装配，代表着T淋巴细胞核仁形成区的rDNA的转录活性即T淋巴细胞的免疫活性。核仁形成区中Ag-NORs的含量取决于：1）脱氧核糖核酸核蛋白体（rDNA）的转录水平；2）核仁形成区及核仁的数量；3）所处细胞分裂阶段。Ag-NORs 的这一特性引起众多学者的重视，80年代末开始，陆续有学者发现恶性肿瘤患者的T淋巴细胞Ag-NORs水平明显降低[2，3]，之后测定外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平较多应用于肿瘤患者的诊断、预后判断及筛查[4]。90年代中期，北京健尔康公司研制生产了“KL型肿瘤免疫图像分析系统”，使对Ag-NORs的检测更加简便、准确，且灵敏度高、重复性好。T淋巴细胞是细胞免疫的主要效应细胞，检测T淋巴细胞Ag-NORs含量，了解T淋巴细胞增殖活性，是反映机体细胞免疫功能状况的可靠手段之一。
本研究中发现，脑卒中患者急性期外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平明显降低，卒中发病后第14-15天Ag-NORs水平较72小时内高，但仍低于正常，说明卒中后细胞免疫功能明显低下，发病2周后有所恢复。脑梗死组与脑出血组比较，Ag-NORs水平无显著差异，说明T细胞免疫功能与病变性质（梗死或出血）无关。脑梗死发病后同一时期重度患者Ag-NORs水平较轻度患者低，说明细胞免疫与病变程度有关,与既往研究结论一致[5]。但出血组同一时期不同病情Ag-NORs水平无显著性差异，可能与样本量过少有关。
脑卒中后，机体免疫反应参与并加重局部脑损伤，卒中发病后又引起机体免疫功能的紊乱。本研究提示卒中后细胞免疫功能低下，且脑梗死发病后细胞免疫功能可能与病情程度有关。增强机体的免疫功能，可能有助于提高疗效、缩短病程及改善预后。
参考文献
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[4] 林其焯，陈云奇，吴卫，等．外周淋巴细胞脱氧核糖核酸蛋白体转录活性分析[J].中华检验医学杂志，1996,19（4）：220-222.
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