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皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射治疗血虚风燥型特应性皮炎的临床及免疫组化研究 窄谱紫外线照射

时间:2019-01-21 来源:东星资源网 本文已影响 手机版

  摘要:目的:观察皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射对血虚风燥型特应性皮炎(AD)的临床疗效,及对AD患者治疗前后皮损局部ICAM-1和VCAM-1表达的调控,探讨AD的发病机理及临床意义。方法:采用皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射治疗29例血虚风燥型AD患者,使用SCORAD积分系统,对治疗前后AD皮损及临床严重度进行评估,同时采用SABC免疫组化法观察治疗前后AD患者皮损局部ICAM-1和VCAM-1阳性面积、平均光密度、总光密度的表达情况。结果:29例AD患者基愈6例(20.69%),显效16例(55.17%),有效7例(24.14%),无效0例,总有效率为75.86%。AD患者治疗前后皮损中ICAM-1及VCAM-1的阳性表达均显著高于正常对照组(P   特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)又称异位性皮炎,遗传过敏性皮炎,是一种与遗传过敏素质有关的慢性炎症性皮肤病,迄今尚缺乏有效的根治性治疗方法,且其发病机理尚不十分明确,近年来黏附分子在AD发病中的作用逐渐受到重视。细胞间黏附分子-1 (Inter-Cellular Adhesion Molecule 1,ICAM-1)与血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)属于黏附分子免疫球蛋白超家族成员,在炎症病理过程中发挥重要作用,目前认为VCAM-1及ICAM-1可有效促进包括嗜酸细胞及T淋巴细胞在内的炎症细胞在特应性皮炎皮损局部的聚集。笔者拟通过观察我院院内制剂皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射治疗血虚风燥型AD患者的临床疗效及治疗前后ICAM-1、VCAM-1在皮损组织的表达,以探讨皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射治疗AD患者的可能分子生物学机制,为中西医结合治疗AD提供理论依据。
  1资料与方法
  1.1临床资料病例选择:治疗组29例AD均来自于皮肤科门诊及住院患者,其中男16例,女13例;年龄14~47岁,平均(26.3±7.5)岁,均符合Hanifin、Rajka特应性皮炎诊断标准[1],及国家中医药管理局制定的四弯风辨证分型中血虚风燥型标准[2]。随机选择正常对照组15例(来源于我院整形科),男9例,女6例,年龄16~45岁,平均(23.4±9.6)岁。两组间年龄构成上无显著性差异,具有可比性。
  1.2纳入标准符合上述诊断标准的AD患者:年龄在12~50周岁;经其它抗过敏治疗无效者且已停药半月以上;不伴有血液系统、肝、肾等慢性疾病者;未经皮质类固醇激素治疗或已停药1月以上。
  1.3排除标准年龄在12周岁以下,50周岁以上;孕妇及哺乳者;伴有血液系统、肝、肾等慢性疾病者;一月内经皮质类固醇激素治疗或其它治疗停药不足半月者;合并其它皮肤病或感染性疾病。
  1.4治疗方法治疗组采用皮炎消净饮Ⅱ号(由苍术、当归、汉防己、黄芩、柴胡等组成的冲剂,产品质量符合《中华人民共和国药典》1995年版1部附录冲剂项下有关规定),由本院中药制剂室提供,每包10g,每次1包,每日3次,温开水冲服,连续服用2个月。同时给予窄谱UVB照射(SS-03型,上海希格玛高技术有限公司生产),照射时患者与操作人员均需戴紫外线防护镜,男性病人生殖器部位严密遮盖。起始照射量均0.5J/cm2,如照射皮肤无红斑反应,以后每次增加10%,最大照射剂量为2.5J/cm2,每周照射2次,待皮疹改善后照射次数递减为每周1次,在维持及次数递减时,剂量不变。若出现疼痛性红斑则暂停照射,待红斑消退后恢复照射,剂量较前减少50%,2个月后判断疗效。记录疗效及不良反应。治疗期间停止使用所有跟AD有关的其它内服药物以及除润肤剂以外的所有外用药物。
  1.5标本制作治疗前活检组织选择红斑、浸润或苔藓样变明显的皮损,治疗2个月后选取相邻皮损部位活检。常规消毒皮肤,以1%利多卡因局部浸润麻醉后梭形切取皮损,标本取下后放入10%福尔马林中予以固定,24h以后进行常规脱水、透明、浸蜡和包埋切片。正常对照组15例均来自我院整形外科手术病人的废弃皮肤组织,选择外观正常,未见明显原发或继发皮损的皮肤组织作为对照。
  1.6临床疗效判断及实验室指标(1)临床疗效判断:采用欧洲AD特别工作组制定的欧洲AD评分标准(SCORAD)计分系统[3],对AD皮损及临床严重度进行评估,包括皮损范围、严重程度、瘙痒和影响睡眠程度;分别于治疗前及治疗后2个月记录SCORAD积分,疗程结束时评估病情:病情改善率(%)=[(治疗前SCORAD积分-治疗后SCORAD积分)/治疗前SCORAD积分]×100%。基愈:病情改善率≥75%;显效:病情改善率为50%~74%;有效:病情改善率为20%~49%;无效:病情改善率<20%。总有效率=(基愈例数+显效例数)/总病例数×100%。
  (2)实验室指标:免疫组化法检测皮损中ICAM-1及VCAM-1的表达。ICAM-1及VCAM-1免疫组化试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。步骤:切片置60℃烤箱烘烤2h;切片脱蜡至水;蒸馏水洗2 min;高压热修复:高压锅内放适量自来水,将修复液倒入烧杯内(体积视切片多少定),将烧杯置于高压锅内煮沸(高压锅不需盖紧),将切片放入装有修复液的烧杯内,盖紧高压锅,加热至设定压力冒气后持续2min,自来水冷却;3% H2O2溶液阻断过氧化物酶,10min;蒸馏水洗2 min,PBS洗3 min;滴加一抗,37℃孵育1 h;流水冲洗3 min,蒸馏水洗3 min,PBS洗5 min;滴加二抗,37℃孵育60min;流水冲洗3 min,蒸馏水洗3 min,PBS洗5 min;DAB显色2min;复染、透明后封片。显微镜下观察,以在细胞膜或/和细胞浆内出现黄色或棕黄色颗粒,且其着色强度高于背景非特异性染色者判定为阳性。采用Carl Zeiss Imaging Systems图像分析软件对免疫组化检测结果进行分析,计算出每个标本的阳性面积、阳性面积平均光密度、总光密度(IOD)。
  1.7统计学处理采用SPSS 17.0统计软件进行统计学处理,计数资料采用均数()±标准差(s)进行统计描述,计量资料组间比较采用t检验,P   表3皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射治疗组
  治疗前后VCAM-1表达(±s)
  组别例数阳性面积平均光密度IOD正常人对照组15309.37±272.910.04±0.0513.92±25.13治疗前AD组2977474.45±48302.96*0.41±0.03*33068.40±21782.26*治疗后AD组2015910.65±9532.39*#0.31±0.05*#4911.79±2821.77*# 注:*与正常组比较,治疗前、后AD组VCAM-1阳性面积、平均光密度、IOD均P

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