【摘要】目的 建立肾石通胶囊中丹酚酸B的含量测定方法。方法固定相： C18柱(250mm×4.6mm,5μm), 流动相：甲醇-甲酸-水（38:1:61）,检测波长：286 nm，流速：1.0ml/min，柱温：30oC。结果丹酚酸B在0.438～2.628μg范围内线性关系良好。平均加样回收率为99.84%,RSD=0.29%。结论本法可用于肾石通胶囊中丹酚酸B的质量控制。
【关键词】HPLC法；肾石通胶囊；丹酚酸B
肾石通胶囊由部颁标准“肾石通冲剂”改剂型制备而成，由金钱草、丹参、木香等多味中药组成的复方制剂。具有清热利湿，活血止痛，化石，排石。用于肾结石，肾孟结石，膀胱结石，输尿管结石。 原肾石通冲剂标准中无含量测定,为了更好地控制肾石通胶囊的质量,对肾石通胶囊中丹酚酸B进行了含量测定方法的研究。
1仪器与试药
仪器：岛津LC-2010AHT型高效液相色谱仪，AUW120D型电子天平。
试药：丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所,批号111562-200302)；甲醇(色谱纯),水为重蒸水，甲酸（分析纯）。肾石通胶囊(批号: 060301、060302、060303)由贵阳天阳生物技术开发有限公司制备。
2方法与结果
2.1色谱条件Shim-pack VP-ODS C18柱(5um，4.6×200mm)，以甲醇-甲酸-水（38:1:61）为流动相，检测波长286nm，流速1.0ml/min。理论板数按丹酚酸B峰计应不低于2000。
2.2对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品适量，加甲醇使其溶解制成每1ml含丹酚酸B 150?g的溶液，即得。
2.3 检测波长的确定紫外扫描, 丹酚酸B对照品在286nm处有最大吸收。
2.4供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，取1.0g，置100ml量瓶中，加入70%甲醇适量，超声30分钟，放冷，用70%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液,用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液，即得。
2.5 线性关系考察配制每1ml含丹酚酸B0.438mg的溶液, 精密吸取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，6ml 置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含丹酚酸B 43.8μg、87.6μg、131.4μg、175.2μg、219.0μg、262.8μg的系列对照品溶液，分别进样10μl测定,测定峰面积,绘制标准曲线，结果表明丹酚酸B在0.438～2.628ug范围内线性关系良好, 回归方程: y =724052.4462x?18387.4，r=0.9999。
2.6精密度试验精密吸取丹酚酸B对照品溶液10ul，重复进样6次，测定峰面积， RSD为0.20％。
2.7重复性试验取同一批样品(060301)6份, 按供试品溶液制备方法制备成供试品溶液,测定丹酚酸B含量。结果RSD=0.43%。
2.8稳定性试验取同一供试品溶液，在0、2、4、6、10h测定，结果RSD为0.76%,表明制备的供试品液在10h内稳定。
2.9加样回收率试验精密称取已知含量的样品(5.12mg/g)约0.5g，共9份，置100ml量瓶中，取三份精确加入丹酚酸B对照品液（0.512mg/ml）各4ml；另取三份精确加入丹酚酸B对照品液（0.512mg/ml）各5ml；再取三份精确加入丹酚酸B对照品液（0.512mg/ml）各6ml。按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，测定丹酚酸B的含量,并计算回收率，结果见表1。
表1加样回收试验结果
样品中丹酚酸B的平均回收率为99.84％，RSD＝0.29％，回收率良好。
3 样品测定
取3批样品,分别按照供试品溶液制备方法制备供试品溶液,按含量测定方法进行测定,测定结果见表2。
表2样品含量测定结果
4讨论
本试验采用HPLC法测定肾石通胶囊中丹酚酸B的含量,供试品制备方法操作简单；含测方法简单、准确,适用于肾石通胶囊的含量测定方法。
参考文献
[1]部颁标准.肾石通冲剂.标准号：WS3-B-0304-90.