种植体龈沟液中血管内皮生长因子浓度的检测分析|血管内皮生长因子

时间:2019-01-24 来源:东星资源网 本文已影响 手机版

  [摘要] 目的 探讨龈沟液血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平与种植体周围组织炎症的关系。 方法 根据30例种植修复患者的种植体周围组织情况(龈沟出血指数、探诊指数)将其分为健康种植体组和炎症种植体组,作为实验组,将健康天然牙作为对照组。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA法) 检测各组牙相关位点龈沟液(GCF)中的VEGF浓度。 结果 炎症种植体组VEGF浓度、各项临床指标及龈沟液量明显高于健康种植体组及天然牙对照组(P 3 mm,SBI≥2,X线片示种植体周围均存在病理性透射区。将健康种植体组及炎症种植体组一同作为实验组。
  1.3.2 龈沟液的采集及定量
  制备统一规格的滤纸条,将Whatman 3号滤纸裁成尺寸相等的宽2 mm,长20 mm的纸条,高温高压消毒后待用。用无菌干棉条擦干牙面,隔湿,将制备好的滤纸条插入种植体颊侧近、远中及舌(腭)侧近、远中龈沟中,1 min后取出,舍去带血滤纸条,将同一牙位的四根滤纸浸润部分剪入装有100 μL生理盐水的Effondorf管中,-70℃冷冻保存。测量剩余部分长度,换算成浸润部分长度,标记。以人血清做样本,用微量加样枪依次取血清0.1 μL,0.2 μL,0.3 μL,…,1.5 μL,分别滴在制备好的同样规格的滤纸条上,测量滤纸条的浸润长度,绘制血清量与滤纸条浸润长度关系的标准曲线(图1),Y=0.011 36+0.146 89X(R2 = 0.998 75),根据标准曲线可换算检测样本中龈沟液量[6]。
  1.3.3 龈沟液中血管内皮生长因子的测定
  冷藏的EP管于室温解冻, ELISA法检测VEGF水平,以标准品VEGF系列稀释后作为阳性对照。VEGF含量与吸光度(A)值呈正比,通过绘制标准曲线计算出采集样本中VEGF的检出量,据此计算VEGF总量(pg)=VEGF检出量×洗提体积;VEGF浓度(pg/μL)=VEGF总量/PISF量[7]。
  1.4 统计学方法
  采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析,计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,若方差不齐,则采用Dunnett T2检验;相关分析采用Spearman秩相关检验,以P   本实验结果显示,炎症种植体组中VEGF浓度明显高于健康种植体组,可以说明VEGF参与了种植体周围炎的炎症反应过程,它可能通过与血管内皮细胞的受体结合,引发自身磷酸化,激活蛋白激酶(MAPK)特异性作用于血管内皮细胞,诱导其分裂增殖以及诱导种植体周围炎症部位的血管形成,还可以增强血浆酶原活化因子(PA)的活性,促进细胞外基质水解,从而促进毛细血管的生成,同时可以增加种植体周围组织血管通透性,利于种植体周围炎症介质参与炎症反应。另外实验结果显示,VEGF、龈沟液量与种植体周围组织临床指标呈正相关,也说明了VEGF在种植体周部位浓度的高低直接反映了该部位的炎症程度。也就是说,炎症反应越明显,该部位血管增生越明显,VEGF特异性促进血管增殖的作用也就越明显。曾启新等[12]通过CD34标记血管内皮细胞,也从侧面证实了炎症组织血管密度与VEGF表达的阳性率以及牙龈指数呈正相关,进一步提示VEGF在一定程度上反映了炎症活跃程度。
  综上所述,VEGF在种植体周围组织炎症反应中具有重要作用,在临床上如果可以通过各种途径将VEGF的产生及生物学效应的发挥有效调控,加强种植体周围炎龈沟液中VEGF的临床检测,将会对临床种植体周围炎的预防和治疗产生积极的意义,但是VEGF与其他细胞因子的关系及VEGF在种植体周围炎病变过程中的具体分子学机制,仍需要进一步的研究。
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  (收稿日期:2011-11-22本文编辑:程铭)
  

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