[摘要] 目的 从实验的角度分析和比较补泻不同配伍补阴方及两方共有“三补”药物组抗衰老作用机制。 方法 观察补泻不同配伍补阴方左归丸、六味地黄丸及两方共有“三补”药物组对D-半乳糖（D-gal）致亚急性衰老大鼠三磷酸腺苷酶（ATPase）及细胞凋亡相关因子Bcl-2和Bax表达的影响。 结果 亚急性衰老大鼠肝、脑组织中ATPase活力降低而脑海马区的Bcl-2和Bax表达升高，左归丸、六味地黄丸及两方共有“三补”药物组干预后，大鼠Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活力表现出不同程度的升高，Bcl-2的表达上调而Bax表达下调。 结论 左归丸、六味地黄丸及两方共有“三补”药物组的抗衰老作用可能与维持细胞膜的稳定性和改善细胞凋亡作用有关，两补阴方尽管存在补泻配伍方法上的不同，但在本研究中未出现显著性药理作用差异，提示“三补”在两方中发挥了优势性作用。
[关键词] 补阴方；抗衰老；三磷酸腺苷酶；细胞凋亡
[中图分类号] R2-03[文献标识码] A[文章编号] 1673-7210（2012）03（a）-0019-03
随着世界性人口老龄化问题的日益突显，抗衰老研究已成为医学研究中的热点之一。左归丸与六味地黄丸均是滋补肾阴的经典名方，现代研究发现两方均有延缓衰老的药理作用。左归丸是张景岳根据六味地黄丸加减化裁而成，前者纯甘壮水，补而不泻，后者以补为主，补泻兼顾。本研究在前期相关实验的基础上，观察了左归丸、六味地黄丸及两方共有“三补”药物组对D-半乳糖（D-gal）致衰老模型大鼠三磷酸腺苷酶（ATPase）及凋亡因子Bcl-2和Bax表达的影响，探讨了两补阴方对衰老模型大鼠的细胞钙稳态、膜稳定性和细胞凋亡的调节作用，从补泻不同配伍方式的角度对两方抗衰作用进行分析和比较。
1 材料与方法
1.1 用药及制备
左归丸（熟地24 g、山药12 g、山萸肉12 g、枸杞12 g、牛膝9 g、菟丝子12 g、龟板胶12 g和鹿角胶12 g）、六味地黄丸（熟地24 g、山药12 g、山萸肉12 g、茯苓9 g、牡丹皮9 g和泽泻9 g）及“三补”药物组（熟地24 g、山药12 g和山萸肉12 g）。中药饮片购自黑龙江中医药大学附属第一医院，左归丸煎制后浓度为6.3 g/mL，六味地黄丸煎制后浓度为4.5 g/mL，“三补”药物组煎制后浓度为2.88 g/mL，4℃冷藏保存。
1.2 动物及分组
取Wistar大鼠60只，雌雄各半，体重（300±20）g，体重区域化后随机分为正常组、模型组、六味组、三补组和左归组，每组12只。
1.3 造模及给药
选用D-半乳糖致亚急性衰老模型[1]。将D-gal 5 000 mg溶于生理盐水500 mL中，配成10 mg/mL浓度的溶液，按125 mg/（kg?d）剂量给大鼠腹腔注射，正常组注射等体积生理盐水，造模周期为8周。左归组、六味组和三补组造模开始的同时按10 mL/kg每日上午分别给予相应治疗药物，正常组和模型组给予生理盐水，每日1次。左归组、六味组和三补组的模型大鼠每日灌服剂量分别为31.5、22.5和14.4 g/kg，给药周期为8周。8周后各组大鼠取肝、脑组织进行组织匀浆和固定，脑组织固定后剥离海马区，按要求保存，待测。
1.4 指标及检测
观察指标包括：肝、脑组织中的ATPase活力和脑海马区的Bcl-2和Bax蛋白表达。测定ATPase试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，Bcl-2和Bax免疫组化试剂盒由北京中杉金桥生物技术有限公司提供，所有指标检测均按照实际说明进行，免疫组化以酶标抗体法染色DAB显色剂显色后，采用Motic Med 6.0彩色病理图像分析系统进行分析和计数。
1.5 统计学方法
实验数据采用SPSS 17.0统计软件进行处理，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，组间比较采用单因素方差分析。以P 0.05），左归组对肝、脑细胞膜的Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活力提升作用模型组差异均有统计学意义（P