[摘要] 目的 探讨谷氨酰胺（Gln）对烫伤大鼠肠黏膜结构和细胞凋亡的影响。 方法 选择健康Wistar大鼠50只随机分为肠内营养组（EN组，20只）、肠内营养加谷氨酰胺补给组（EN+Gln组，20只）和假烫伤组（10只），制备总烧伤面积（TBSA）为25%的Ⅲ度烫伤动物模型，伤后早期分别给予肠内营养制剂能全力和能全力加Gln，于24、72 h观察肠黏膜结构，并检测细胞凋亡和血浆二胺氧化酶活性变化。 结果 大鼠在严重烫伤后肠黏膜受损，细胞凋亡较假烫伤组增多（P DAO是肠黏膜细胞的标志酶，存在于哺乳动物小肠黏膜绒毛上层，其他组织和细胞中几乎不存在DAO。生理状况下，血浆中DAO活性很低，在肠黏膜受损时，肠黏膜上皮细胞受损坏死后DAO释放增加，进入淋巴管和血流，使血中DAO的含量升高而肠黏膜活性下降，其是反映小肠黏膜结构和功能较理想的指标[8]。在本实验中，严重烫伤后EN组和EN+Gln组DAO活性均比假烫伤组增高，烫伤72 h后两组DAO活性均呈下降趋势，但EN+Gln组下降更明显，说明Gln能使严重烫伤后血浆DAO活性下降，减少肠黏膜的损伤。Peng等[9]的研究表明，在应用Gln后，治疗组的血浆DAO活性降低，但14 d后仍高于正常水平，说明应用Gln虽减少了肠黏膜的损伤，但是不能治愈该损伤。本实验虽作用时间较短，但实验结果与Peng等[9]相似。
细胞凋亡时钙镁依赖性核酸内切酶被激活，使DNA发生断裂，产生3"-OH末端，故可用末端脱氧核苷酸转移酶（TDT）介导将标记的dUTP加到DNA分子有凹缺的3"-OH末端（TUNEL），从而检测凋亡细胞，此方法是目前研究细胞凋亡的最常用的技术，具有高敏感性和特异性且能够识别凋亡早期的细胞。本实验采用TUNEL法检测肠黏膜细胞凋亡发现，烫伤后大鼠的肠黏膜AI值比假烫伤组高，说明烫伤后大鼠的肠黏膜凋亡数量增加，小肠的萎缩与之有关；与EN组各时间点相比，EN+Gln组AI均降低，说明Gln能促进减少细胞凋亡。Kenji等[10]通过实验证实，在内毒素血症的大鼠中应用Gln能增加Bcl-2 mRNA表达并减少caspase-3的表达，说明Gln能抑制肠黏膜的细胞凋亡。Kana等[11]发现，出血性休克的大鼠上应用Gln能够保护肠黏膜细胞，抑制细胞凋亡。Gln抑制细胞凋亡的可能机制为：①Gln通过核酸合成的途径抑制细胞因子诱导的细胞凋亡[12]；②Gln增强凋亡抑制基因Bcl-2的表达；③Gln增加热休克蛋白（Hsp70）的水平和提升谷胱甘肽（GSH）含量，两者均具有抑制细胞凋亡的作用[13]。
有研究表明，大鼠在严重的烫伤后肠绒毛的高度和肠黏膜的厚度均较正常大鼠低[14]。在本实验中，烫伤后大鼠的肠黏膜厚度和肠绒毛的高度均低于正常组，EN+Gln组和EN组都有恢复于正常的趋势，但在相同时间点EN+Gln组较EN组更接近正常值。Lü等[15]实验证实，给烧伤大鼠应用Gln，对受损肠黏膜的血流、肠黏膜厚度和肠绒毛高度均有逆转作用，说明Gln可减轻烧伤后肠黏膜受损程度，促进肠黏膜修复，与本实验结果一致。
综上所述，本研究证实，大鼠在严重烫伤后肠黏膜受到损伤，Gln强化的早期肠内营养能减少严重烫伤大鼠的肠黏膜上皮细胞的凋亡，促进肠黏膜恢复，更好的维护肠黏膜屏障的作用，但是Gln保护烫伤后肠黏膜受损的具体机制尚不十分清楚，抑制细胞凋亡可能只是其作用机制之一。深入探讨其机制并采取相应的治疗策略，将有助于控制严重烫伤后全身炎症反应综合征（SIRS）及多器官障碍综合征（MODS）的发生，对降低并发症、改善治疗效果都具有重要的临床意义。
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（收稿日期：2011-12-06本文编辑：程铭）